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腎上腺素ELISA試劑盒供應(yīng)商

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更新時(shí)間:2024-11-30 18:14:59瀏覽次數(shù):161次

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猴間羥腎上腺素(MN)ELISA試劑盒  



酶聯(lián)免疫吸附法


酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一種靈敏、特異的免疫學(xué)技術(shù),用于檢測(cè)抗原或抗體的存在。其基本原理是將抗原或抗體與酶結(jié)合,形成酶標(biāo)抗原或抗體,保留其免疫活性,同時(shí)又保留酶的活性。然后將酶標(biāo)抗原或抗體與固相載體表面結(jié)合,形成酶-抗原-抗體復(fù)合物。最后通過(guò)底物顯色反應(yīng),根據(jù)顏色變化來(lái)檢測(cè)抗原或抗體的存在。ELISA具有高靈敏度、高特異性、快速、易操作等優(yōu)點(diǎn),在醫(yī)學(xué)、生物領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。


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試劑盒性能


 檢測(cè)范圍:5 pg/mL – 160 pg/mL。

 靈敏度:檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL。

 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。


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實(shí)驗(yàn)步驟


1. 準(zhǔn)備試劑盒:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘以上,使試劑盒恢復(fù)至室溫。

2. 加樣:分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和空白孔,每孔加入50μl。

3. 孵育:用封板膠紙封住反應(yīng)孔,輕輕振蕩混勻,37℃孵育1小時(shí)。

4. 洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。

5. 加酶標(biāo)二抗:每孔加入50μl酶標(biāo)二抗溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育30分鐘。

6. 洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。

7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育15-20分鐘。

8. 終止反應(yīng):每孔加入50μl終止液,輕輕振蕩混勻。

9. 讀數(shù):用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處讀取各孔的光密度值。


操作注意事項(xiàng)


1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。

2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3. 濃度為 0 的標(biāo)準(zhǔn)品可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,終結(jié)果乘以5才是樣本終濃度。

4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

6. 若中英文說(shuō)明書有誤,請(qǐng)以中文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

7. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

8. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。


猴間羥腎上腺素(MN)ELISA試劑盒 

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洗板方法


1.手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5次。

2.自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。


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結(jié)果判斷:


1. 每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設(shè)置復(fù)孔,則應(yīng)取其平均值計(jì)算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

3. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測(cè),計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。 


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ELISA試劑盒的作用


ELISA試劑盒是一種用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的特定抗體的試劑盒,例如抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)試劑盒。

ELISA試劑盒基于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。

ELISA試劑盒具有靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)便、安全、快速等優(yōu)點(diǎn),可以用于檢測(cè)類風(fēng)濕因子、病毒、細(xì)菌等,在臨床診斷、科研和生物制品檢測(cè)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。


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